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抑菌圈測量原理分析介紹

更新時(shí)間:2023-07-07      點(diǎn)擊次數:2735
  一、抑菌圈法又叫擴散法,是利用待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周?chē)募毦L(cháng)受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈,根據抑菌圈大小判定待測藥物抑菌效價(jià)的一種方法。抑菌圈法操作便捷、簡(jiǎn)單易行、成本低廉、結果準確可靠,是抑菌試驗的經(jīng)典方法,被廣泛使用。常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑制工具菌生長(cháng)的物質(zhì),如抗生素等,便會(huì )在該菌落周?chē)纬晒ぞ呔荒苌L(cháng)的抑菌圈,很容易被鑒別出來(lái)。
 
  二、主要有K-B法(Kirby-Bauertest)、牛津杯法和打孔法三種。K-B法即濾紙片法,選用質(zhì)地均勻的濾紙,用打孔機打成直徑相同的圓片,滅菌后烘干,浸泡于待測樣品中,然后置于試驗平板中培養一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。牛津杯法又稱(chēng)杯碟法,將已滅菌的牛津杯置于試驗平板中,往杯中注入一定量的待測樣品,培養一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。打孔法,是指用已滅菌的打孔器或鋼管在試驗平板上打孔,往孔中注入一定量的待測樣品,培養一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。
 
  三、菌種的活化及菌液的制備:將冷凍保存的菌種劃線(xiàn)接種至平板培養基,37℃培養24h;挑單菌落接種至100mL液體培養基,37℃、200r/min搖床培養過(guò)夜,菌液備用。傾注平板法:先往已滅菌的平板中接種1mL菌液,然后傾注約20mL已冷卻至50℃左右的平板培養基,混合均勻,水平靜置凝固后備用。預加菌液傾注平板法:往已冷卻至50℃左右的平板培養基中注入一定量的菌液,混合均勻,傾注平板(約20mL/平板),水平靜置凝固后備用。
 
  四、結果表明:打孔法操作簡(jiǎn)單、方便快捷,獲得的抑菌圈質(zhì)量高、重復性好,是優(yōu)先選用的方法。
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